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薄层色谱技术实战经验技术分享

发布于:2018年07月14日 来源:www.fuhai360.com
[摘要]西安实验室设备中的薄层色谱扫描仪是化学的一种分离和分析方法,也是现代有机合成、高分子材料分离与解析的重要方法。结合柱分离的薄层色谱技术能够具有充分的实战意义。
  中的薄层色谱扫描仪是化学的一种分离和分析方法,也是现代有机合成、高分子材料分离与解析的重要方法。结合柱分离的薄层色谱技术能够具有充分的实战意义。
  原理:薄层色谱是一种微量分析的分离过程,它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上,利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处,在色谱展开整个过程中,样品的成份受到正反不同的力的作用。1、 流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相;2、样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极 -(诱导) - 偶极相互作用,氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同,整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。基于这点,TLC系统(流动相和固定相)必须与样品很好地匹配。用显色试剂处理,许多组份可在日光或紫外灯光下检视。色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。
  应用:1、定性鉴别;化学上经典的定性鉴别,例如经典的有机定性分析或经典的毒物分析,是利用各种化合物的溶解度不同和所含功能基的不同,用溶剂提取或用试剂处理,把它们分组或分为单一组分,然后作试管反应或点滴反应(颜色反应),或根据它们衍生物的理化性质进行定性鉴别。这种方法的缺点是样品用量较大,分离手续麻烦,分析时间较长(几小时或几十个小时),并可能有杂质干扰,现采用合适的展开剂和显色剂在薄层上作为分离和鉴别,根据样品中组分的值和显色情况,同时用标准作对照,一般即能确证为某一化合物,用薄层色谱法定性,样品用量小,分离方便,分离时间短(几分钟或几十分钟),检出灵敏度高。例如,在毒物分析中检验是否巴比妥安眠药中毒时,取胃内容物或尿样品,先用盐酸酸化后,用乙醚提取,乙醚提取液脱水,过滤蒸干,溶于无水乙醇中,点在硅胶版上用氯仿无水乙醇(36:1)展开,用硫酸汞二苯偶碳酰肼试剂显色,并用标准品对照,依次见出巴比妥,苯巴比妥,戊巴比妥和异巴比妥。鉴别速度快(1小时),这对于抢救中毒患者和及时为医生提供治疗方案极为重要。2、化合物质量控制与杂志检查;药品的纯度,通常用熔点,吸光值等物理常数作为鉴定的指标。但是薄层检查也是药品质量控制和杂质检查的一种有效方法,有时甚至比一般方法更有效。一些国家的药典和药品规范已经采用。方法是把一定量的样品溶液(例如,相当于样品10%)点在薄层上,用展开剂展开并显色,同时用纯品作对照,如果样品不只显示出纯品位置一致的一个斑点,则表示含有杂质。进一步可用薄层作杂质的限量检查。在上例中,如果已经知道显色剂对杂质的最小检出量为0.1%,在薄层上点样后不显出杂质斑点,则杂质的量低于0.1%,或低于限度,也就是样品的纯度不低于99.9%。例如镏体药物的合成和精致工作中,常含结构类似的杂质,即按上述方法控制其质量和杂质的限量。