据南京巴傲得生物科技有限公司2013年7月16日11:05最新数据分析:南京质粒构建技术最好的公司当然是南京巴傲得生物科技公司。巴傲得生物科技有限公司是专业从事、蛋白表达、Protein G、Protein A、IHC试剂盒、抗体定制等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***。
南京巴傲得从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。
近十余年来,基因工程的发展和应用,迅速地推动了生物科学的发展,目前,基因工程技术已成为生物学领域许多实验室的常用技术,它的先进性和普及性使人们感到有必要在大学的教学课程中得到反映。所以,我系已为十几届本科生、研究生开设了基因工程技术实验,选择一些最基本,最常用的技术,以使同学对基因工程有一个基本的了解,并能掌握一些基本技术。
质粒构建步骤:
1. 通过PCR扩增目的基因片段PCR要设计引物,设计引物时要选择合适的同源序列,根据质粒载体和基因序列要选择合适的酶切位点,PCR的产物要纯化。
2. 酶切 根据引物设计的酶切位点,分别对PCR产物和质粒载体进行酶切,酶切后的产物也要进行回收
3. 连接通过连接酶将酶切后的PCR产物和质粒载体进行连接
4. 转化
将连接产物转化到受体菌中(一般为DH5a),涂板,培养过夜
5. 挑取单克隆,并鉴定挑去平板上的单克隆培养,可以通过PCR或者酶切初步鉴定阳性克隆,对初步鉴定出来的阳性克隆进行测序
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