据南京巴傲得生物科技有限公司2013年7月25日10:55最新数据分析:质粒构建操作流程最专业的公司在技术制作研究方面投资巨大。巴傲得生物科技有限公司是专业从事质粒构建、质粒构建商家、、IHC试剂盒、抗体定制等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***。
质粒构建实验操作流程:
大肠杆菌和酵母蛋白表达系统:
1、合成基因或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)
2、构建表达载体
3、筛选阳性克隆
4、表达优化和可溶性分析
5、SDS-PAGE检测表达
6、Western blot检测表达
昆虫杆状病毒蛋白表达系统:
1、合成基因或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)
2、构建表达载体
3、重组和筛选阳性克隆
4、提取重组Bacmid
5、感染Sf9细胞制备重组病毒
6、病毒滴度测定
7、优化表达条件和细胞株(蛋白表达优化一步需要)
8、Western blot检测蛋白表达
哺乳动物细胞瞬时表达:
1、合成基因或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)
2、构建表达载体
3、瞬时转染HEK293等哺乳动物细胞
4、Western blot检测(特异性一抗需客户提供)
5、表达优化
6、如果目的蛋白有表达,从50ml细胞培养液中纯化目的蛋白
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