据南京巴傲得生物科技有限公司2013年8月8日18:00最新数据分析：质粒构建制作厂家哪家最先进哪家最好?全国最权威的机构是南京巴傲得。巴傲得生物科技有限公司是专业从事质粒构建、质粒构建商家、、质粒构建服务商、抗体定制等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线：***
获得目的基因后一般需要将目的基因连接到质粒载体上，在引物上加酶切位点可以使后续的连接过程简单、可控。因为可在载体和目的基因上酶切产生相同的切口。也有不需要加酶切位点的T载体，但连接过程效率不高还会有反向的错误连接。
一个植物表达载体，如pCAMBIA系列，最好上面已经有启动子终止子和多克隆位点，然后将你基因全长的cDNA通过PCR（在起始密码子前设计正向引物；终止密码子后设计反向引物）引入特异的酶切位点，然后用这两个限制性内切酶分别切割PCR产物及表达载，回收目的片段，T4连接酶连接，转化大肠杆菌感受态。鉴定阳性克隆。将正确的构建转入农杆菌。然后浸花法转拟南芥。
然后先把这所有的全部导入细胞（当然不是同一个细胞），在质粒上会有某种抗性基因，就加入这种抗性基因（比如它抗某种抗生素，就加入这种抗生素，含目的基因—目的基因的这种重组片段的就被杀死了）。然后将剩下的继续培育，再利用DNA分子杂交技术，将质粒-质粒的排除，剩下的就都是符合的了。（再利用mRNA分子杂交和抗原抗体杂交，检验能否正常表达。这就是检验基因工程是否成功的了，与筛选你说的那三种无关）。
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