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南京权威质粒构建proteinA产品供应商推出先进技术

发布于:2013年09月13日 来源:www.fuhai360.com
[摘要]南京权威质粒构建proteinA产品供应商推出先进技术。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、南京权威质粒构建、最先进的蛋白表达、抗体定制权威机构、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:***

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质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,

选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。有的转染试剂还会提供一些促进DNA凝聚的成分,使得DNA形成转染复合物时更致密一些,更容易转染一些。纯化质粒的质量无疑会影响转染效率。哺乳动物细胞总归是比大肠杆菌娇气,转染难度高些,因而要求的DNA纯度要更高些。早年要做转染真是大阵仗啊,光是提质粒做超离就令人皱眉。

最令人头疼的是内毒素了。内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上特有的成分,主要是脂多糖中的类脂A(lipopolysaccharides),在细菌被裂解时被释放出来,由于其化学结构和特性,在质粒提取的过程中内毒素很容易混入质粒DNA中共同纯化出来。内毒素的存在会严重地影响转染效率,此外内毒素可能会激活造血细胞(例如B细胞、巨嗜细胞等)的非特异免疫反应,造成实验中的假阳性。所以质粒DNA转染时应尽量采用无内毒素污染的超纯质粒。

 

 

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