据南京巴傲得生物科技有限公司2013年10月15日11:00最新数据分析：江苏质粒构建公司是质粒构建最先进的技术公司,值得客户们信赖。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、、最先进的蛋白表达、供应商、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线：***
通过分子生物学手段构建重组质粒，将其转入野生型大肠杆菌W3110，分析含苏氨酸操纵子基因的质粒及质粒定点突变解除反馈抑制时，对 L-苏氨酸积累的影响。【方法】以 W3110染色体DNA为模板，PCR扩增苏氨酸操纵子基因，即启动子THrLp 、编码前导肽基因thrL以及thrA 、thrB 、thrC 基因，通过重叠延伸PCR的方法对thrA 基因定点突变，解除苏氨酸对它的反馈抑制，构建出重组表达质粒pWYE112 和pWYE134,5L发酵实验测定L- 苏氨酸的产量。
【结果】经 5L发酵罐发酵产酸实验，W3110 的L-苏氨酸产量为0.036±0.004g/L，携带含苏氨酸操纵子质粒的W3110 菌株L-苏氨酸产量为2.590±0.115g/L ，质粒上thrA解除反馈抑制后，L- 苏氨酸的产量增加到9.223±1.279g/L 。【结论】过表达苏氨酸操纵子基因可以使 L-苏氨酸积累，进一步解除thrA 基因的反馈抑制，可以增强L- 苏氨酸积累的效果，为L- 苏氨酸工程菌改造的进一步研究奠定了基础。
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